產(chǎn)品描述

DAPI是一種常用于細(xì)胞核染色的藍(lán)色熒光染料，優(yōu)先結(jié)合雙鏈DNA，尤其是與小溝中的AT區(qū)域結(jié)合。此外，DAPI亦可結(jié)合RNA，但結(jié)合模式不同。與DNA復(fù)合物相比，DAPI/RNA復(fù)合物的熒光發(fā)射波長(zhǎng)較長(zhǎng)（約500 nm），而DAPI/DNA復(fù)合物的發(fā)射波長(zhǎng)為約460 nm。

在多色熒光染色技術(shù)中，DAPI作為常用的核染色劑，因其藍(lán)色熒光能夠與綠色、黃色或紅色熒光形成鮮明對(duì)比。DAPI具有較高的細(xì)胞核特異性，幾乎不染色細(xì)胞質(zhì)。本染液濃度為3 μM，非無(wú)菌制劑。

訂購(gòu)信息

運(yùn)輸與保存

藍(lán)冰運(yùn)輸。-20℃避光保存，有效期 12個(gè)月。

使用方法

1.     貼壁細(xì)胞的復(fù)染

1.1  樣品準(zhǔn)備

1.1.1      使用適當(dāng)?shù)墓潭▌┕潭ㄙN壁細(xì)胞樣品，確保細(xì)胞形態(tài)保持完整。固定后，使用DAPI染料進(jìn)行細(xì)胞核核染色。

1.2  復(fù)染流程

1.2.1      用PBS短暫平衡樣品；

1.2.2      加入適量的DAPI染液，確保覆蓋細(xì)胞，孵育3-5min；

1.2.3      用PBS漂洗樣品數(shù)次，輕輕吸去多余液體，避免細(xì)胞干燥；

1.2.4      在配有合適濾片的熒光顯微鏡下觀察樣品。

2.     懸浮細(xì)胞的復(fù)染

2.1  樣品準(zhǔn)備

2.2.1 收集懸浮細(xì)胞2×105~1×106個(gè)細(xì)胞，通過(guò)離心收集沉淀，棄去上清；

2.2.2 輕彈試管，使沉淀在剩余的液體中重懸，在加入1mL PBS；

2.2.3 將細(xì)胞懸液緩慢的加入4mL乙醇中，同時(shí)以最大的速度渦旋。將含有細(xì)胞的乙醇在-20°C放置5-15min；

2.2.4 通過(guò)離心，使細(xì)胞沉淀，棄上清；

2.2.5 輕彈試管，使沉淀松散，在加入5ml PBS。

2.2  復(fù)染流程

2.2.1 離心使細(xì)胞沉淀，棄上清，輕彈試管，使沉淀松散，加入2~3mL DAPI染液；

2.2.2 室溫下孵育15min；

2.2.3如果使用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞，將樣品離心后，棄上清，用新鮮的緩沖液重懸沉淀。在顯微鏡載片上滴加一滴細(xì)胞懸液，加蓋片后觀察。

注意事項(xiàng)

1． 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

2． 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

3． 使用觀察藍(lán)色熒光的熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡。

4． 自備PBS，固定液及抗熒光淬滅封片液。

5． 第一次使用本試劑盒時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。

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