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這篇文章主要講的是幾種常用的RNA提取方法。1、異硫氰酸胍氯化銫超速離心法原理：使用蛋白質(zhì)變性劑異硫氰酸胍有效抑制RNA酶的活性，經(jīng)過(guò)起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質(zhì)，進(jìn)行密度梯度超速離心，RNA沉淀于管底，而DNA與蛋白質(zhì)在上清中。使用這種方法，不但能得到高質(zhì)量的RNA，而且能同時(shí)分離出細(xì)胞染色體DNA.本法對(duì)于冷凍時(shí)間長(zhǎng)、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不易分離的組織標(biāo)本以及富含RNA酶的組織細(xì)胞(如胰腺)的RNA提取尤其適合。此法提取的RNA的質(zhì)量好和成功率高，已成為提取哺乳動(dòng)物細(xì)...

科研人員還在為如何選擇核酸染料而煩惱嗎？帶您認(rèn)識(shí)幾款優(yōu)秀的核酸染料一、李記GelRed,李記GelGreen——李記生物研發(fā)的兩款核酸染料。據(jù)不*統(tǒng)計(jì)，有強(qiáng)烈致癌、致畸作用的EB染料仍以90%的優(yōu)勢(shì)占據(jù)核酸染料使用量多，在眾多的EB替代染料中，名氣最大的要數(shù)Life公司的SYBR系列、美國(guó)Biotium公司的GelRed,GelReen染料，其他替代染料要么是EB,吖啶橙改名，要么是國(guó)內(nèi)不成熟的仿品，安全性毫無(wú)保障。Life公司的SYBRGreen,SYBRGoad,SYBR...

一、細(xì)胞增殖與細(xì)胞活性細(xì)胞增殖是活細(xì)胞的重要?理功能之?，細(xì)胞增殖與細(xì)胞活性檢測(cè)所用的方法相近，但實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌＜?xì)胞增殖是通過(guò)細(xì)胞增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)判斷細(xì)胞的數(shù)量變化，例如細(xì)胞計(jì)數(shù)法，反應(yīng)的就是細(xì)胞真實(shí)的數(shù)量。而細(xì)胞活性檢測(cè)，則是通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞受到藥物或其他措施處理后，標(biāo)志物產(chǎn)量或濃度的變化，進(jìn)而判斷藥物或處理措施的作用，細(xì)胞活性檢測(cè)所得結(jié)論，往往反映了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的目的。細(xì)胞增殖檢測(cè)，因檢測(cè)標(biāo)志物的不同，目前大致分為四類(lèi)：DNA合成檢測(cè)、代謝活性檢測(cè)、細(xì)胞增殖相關(guān)抗原檢測(cè)和ATP濃度...

生物大分子的貯藏保存可分為干態(tài)和液態(tài)貯藏兩種。蛋白質(zhì)失活受多種理化因素的影響，主要有空氣、溫度、水分、光線(xiàn)、酸堿度、樣品狀態(tài)、微生物活動(dòng)、保存時(shí)間和容器等。這些因素可單獨(dú)起作用，但更多情況是協(xié)同作用?？偟膩?lái)說(shuō)，蛋白質(zhì)的保存主要考慮其構(gòu)型穩(wěn)定、活性中心的保護(hù)、避免輔助因子喪失等，以防止其變性、解聚或降解。由于溫度和水分對(duì)蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性影響很大，故蛋白質(zhì)最好是低溫、冷凍或冷凍干燥后低溫干燥保存。1.液態(tài)保存(1).在低溫下保存蛋白質(zhì)對(duì)熱敏感，溫度越高，穩(wěn)定性越差。因此，低溫保存蛋...

牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumin,BSA）是牛血清中的一種球蛋白，又稱(chēng)第五組分（需要注意的是，第五組分并不是BSA的一種組份，而是EdwinJ.Cohn教授早期從血液中通過(guò)特定的分離技術(shù)得到5種組份，其中第五種就是白蛋白），CAS號(hào)為9048-46-8，包含583個(gè)氨基酸殘基，分子量為66.430kDa，等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用，無(wú)免疫球蛋白IgG牛血清白蛋白產(chǎn)品血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用...

重組腸激酶（Enterokinase,lightchain）是一種高度專(zhuān)一性識(shí)別Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶，在Lys的C端水解多肽。它可以將胰蛋白酶原轉(zhuǎn)變?yōu)橐让福部梢詫в羞@個(gè)識(shí)別序列的融合蛋白切開(kāi)。由于腸激酶具有高度專(zhuān)一性，水解效率高的特點(diǎn)，它被廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)，其應(yīng)用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂，尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。腸激酶具有高度專(zhuān)一性，水解效率高的特點(diǎn)，它被廣泛地應(yīng)...